包涵體蛋白表達是一種在基因工程中常見的現(xiàn)象，主要發(fā)生在外源基因在原核細胞，尤其是大腸桿菌中高效表達時。在這種情況下，重組蛋白形成的是由膜包裹的高密度（1.3 mg/ml）不溶性蛋白質(zhì)顆粒，這些顆粒在顯微鏡下觀察時為高折射區(qū)，與胞質(zhì)中其他成分有明顯區(qū)別。

包涵體的形成可能與多種因素有關(guān)，包括蛋白表達量過高、氨基酸組成、所處的環(huán)境以及蛋白的來源等。例如，當?shù)鞍缀铣伤俣冗^快時，可能導(dǎo)致蛋白沒有足夠的時間進行正確的折疊，二硫鍵不能正確配對，進而導(dǎo)致蛋白質(zhì)無法達到足夠的溶解度，最終形成包涵體。

由于包涵體中的蛋白是非折疊狀態(tài)的聚集體，因此不具有生物學(xué)活性。為了獲得具有生物學(xué)活性的蛋白質(zhì)，包涵體的純化和復(fù)性過程至關(guān)重要。包涵體的純化主要包括樣本破碎、洗滌、溶解、復(fù)性、純化以及鑒定幾個步驟。其中，復(fù)性是一個非常復(fù)雜的過程，常用的復(fù)性方法包括稀釋復(fù)性、透析復(fù)性、凝膠過濾層析和離子交換層析等。

產(chǎn)品簡介

您是否厭倦了花費數(shù)天時間進行轉(zhuǎn)化以及精細的細胞培養(yǎng)以獲得您感興趣的蛋白質(zhì)？在這個時間就是金錢的快節(jié)奏世界中，您是否正在尋找具有成本效益的蛋白質(zhì)生產(chǎn)平臺？ 與傳統(tǒng)的基于細胞的方法相比，無細胞蛋白表達是加速您的研究開發(fā)的優(yōu)質(zhì)解決方案，使您節(jié)約控制成本并靈活調(diào)控反應(yīng)參數(shù)，以更快、更有效方式的獲得目的蛋白產(chǎn)物。

“無細胞蛋白表達技術(shù)提供的純化蛋白質(zhì)，在數(shù)量和速度上都超過常規(guī)方法。表達的每一種蛋白質(zhì)都可以是一種治療候選物，并且可以使我們比以往快2個月生成數(shù)據(jù)包，同時節(jié)省資金。通過繼續(xù)使用無細胞蛋白技術(shù)，我們預(yù)期將可以在未來18個月內(nèi)，節(jié)省一名全職員工約6個月的時間。” ——國外客戶對無細胞蛋白表達技術(shù)的評價。

PLD無細胞蛋白表達試劑盒依賴T7轉(zhuǎn)錄和大腸桿菌內(nèi)源性翻譯機制。反應(yīng)體系包含轉(zhuǎn)錄、翻譯、蛋白質(zhì)折疊和能量再生所需的所有生物成分，例如核糖體、tRNA、分子伴侶、代謝酶、翻譯起始和延伸因子，試劑盒能夠以PCR產(chǎn)物、環(huán)狀質(zhì)粒為模板，您只需將模板添加到其中即可實現(xiàn)目的蛋白質(zhì)的快速、高效表達。

產(chǎn)品特色

	快速：最快1小時即可檢測到目的蛋白，10小時蛋白合成達到峰值；
	模板靈活：支持質(zhì)粒模板以及PCR模板*；
	表達量高：最高可實現(xiàn)3mg/mL以上產(chǎn)率的蛋白制備；
	適用蛋白種類多：可表達各種類型的蛋白，包括富含二硫鍵的蛋白、膜蛋白等。
	操作簡單：一步反應(yīng)，僅需將反應(yīng)組分與DNA模板混合即可制備蛋白；
	高通量：可在96孔板中進行表達篩選，當檢測到陽性表達后，可進行體系放大；
	蛋白共表達：可在同一反應(yīng)中，同時表達多種蛋白；